产品描述:
Cyclopamine是一种特异性的Hedgehog (Hh)信号通路拮抗剂，作用于Smoothened (Smo)，IC50为46 nM。
靶点 Smoothened (SMO)
IC50 46 nM [1]
体外研究:
Cyclopamine 抑制Hedgehog信号通路， IC50 为46 nM, 且在[3H]Hh-Ag结合实验中，作用于CHO-K1细胞，抑制人类Smo受体活性，IC50为 280 nM。[1] Cyclopamine作用于表达Patched (PTCH) mRNA的肠源性肿瘤细胞，显著抑制 Hedgehog通路活性，这种作用存在剂量依赖性，且浓度为3 μM时，抑制肿瘤细胞生长，抑制达75-95%, 但是作用于不表达PTCH mRNA的结肠癌细胞没有效果，说明Cyclopamine 特定作用于Hedgehog 通路，且没有毒性。[2]通过与Smo直接作用而抑制Hedgehog信号，Cyclopamine (10 μM) 抑制SMOhigh Cyclopamine-反应细胞系L3.6sl和 Panc 05.04增殖，抑制达 75-80%,且使凋亡率提高2.5到 3.5倍，但是不影响BxPC3-SMOlow 细胞系。[3] Cyclopamine 处理E3LZ10.7细胞系，显著降低Snail mRNA，且提供E-钙粘着蛋白转录。Cyclopamine处理Hedgehog依赖型 L3.6pl 细胞，显著抑制浸润型细胞, 使转移细胞降低500多倍，但是对Hedgehog非依赖性细胞系Panc-1没有影响。[4]
研究:
Cyclopamine 每天按50 mg/kg剂量处理小鼠，持续22天，消除HUCCT1移植瘤，且没有明显副作用。[2] Cyclopamine 按1.2 mg剂量处理Panc 05.04和 L3.6sl驱动的肿瘤7天，前者诱导明显的肿瘤细胞凋亡，后者降低肿瘤质量，降低达50-60%，但是作用于BxPC3-SMOlow肿瘤没有效果。[3] Cyclopamine单独处理E3LZ10.7 和L3.6pl移植瘤，显著抑制肿瘤转移，且和 Gemcitabine联用处理，完全废除转移。[4]
激酶实验 Gli-Luc实验测定Hh 信号通路末期, 即使用荧光素酶进行读数，测定Gli的转录调控。Cyclopamine 在DMSO中连续稀释用于实验，然后加到空的实验板上。TM3Hh12 细胞(TM3 细胞含Hh反应受体基因结构 pTA-8xGli-Luc) 悬浮在含5% FBS 和15 mM Hepes pH 7.3的F12 Ham’s/DMEM (1:1)培养基上, 加到实验板上，与Cyclopamine在37oC下温育30分钟左右。1 nM Hh-Ag 1.5 加到实验板上，然后在37oC下温育。48小时后，在实验板中加入Bright-Glo或MTS，然后在492 nm处测定发光度或吸光度。通过分析反应曲线，使用R统计软件包测定IC50值。
细胞试验: [2]
细胞系 SEG1, OE33, KYAE, KYSE180, SNU1, AGS, SNU16, NCI-N-87, HUCCT1, PANC1, PL5, PL6, BXPC3, HS766T, KYSE150, GBD1, DLD1, 和HCT116
浓度:溶于DMSO, 终浓度为3 μM
处理时间:4天
方法:
在96孔板上，用Cyclopamine 处理细胞。通过MTS实验测定细胞活力。进行CellTiter96比色测定，进行2和4天，然后在490 nm处通过测定光密度而测定存活细胞。
动物实验: [2]
动物模型:皮下注射HUCCT1细胞的无胸腺裸鼠
配制:溶于DMSO, 然后用盐水稀释
剂量:50 mg/kg/day
给药处理:皮下注射处理
溶解度:1% DMSO/30% polyethylene glycol/1% Tween 80, 30 mg/mL
| 货号 |
品名 |
产地 |
规格 |
价格 |
| C-8700 |
Cyclopamine环巴胺 |
LC |
5MG |
1450 |