由于基因转染到细胞内之后要一段时间才能表达出蛋白质。所以筛选不能太早；但是也不能太晚，因为转染了外源基因的细胞代谢负荷较大，增值较慢，时间长了就会被没有外源基因转入的细胞所淹没，最终导致筛选不出阳性克隆，一般要在转染24小时之后才开始加G418筛选。随着细胞的代谢G418的浓度和活性都回下降，所以每3~5天都要更换一次含有G418的筛选液。这时药物浓度可以降至200ug/ml。 培养液
加药筛选约6天左右，细胞会大量死亡，孔中只剩下的细胞寥寥无几。这时会出现两个问题：1.死亡的细胞会裂解释放出有害物质，导致那些有neo表达的阳性细胞死亡，即非选择性死亡。2.孔中细胞数目很少，细胞之间的信号会变得很弱，也会导致阳性细胞的状态不佳甚至死亡。这个时候需要一种特殊的培养液：假如你要转染3T3细胞，在3T3细胞汇合度达到80%的时候，换液，培养过夜之后收集培养液，通过滤器消毒，和新鲜的培养液按1：1混合备用。再转染后筛选过程中就可以应用这种培养基。
订购指南：
| 品名 | 产地 | 货号 | 规格 | 价格 |
| G418(G 418,G-418,Geneticin) | Amresco | E859 | 1g | 300 |
| G418(G 418,G-418,Geneticin) | Amresco | E859 | 5g | 1400 |
| G418(G 418,G-418,Geneticin) | Merck原装 | 345810 | 1g | 883 |
| G418(G 418,G-418,Geneticin) | Merck原装 | 345810 | 5g | 2802 |
| G418(G 418,G-418,Geneticin) | Gibco原装 | 11811023 | 1g | 828 |
| G418(G 418,G-418,Geneticin) | Gibco原装 | 11811031 | 5g | 2960 |
| G418(G 418,G-418,Geneticin) | Gibco原装 | 11811098 | 25g | 14593 |
| G418(G 418,G-418,Geneticin) | Gibco | 11811023 | 1g | 480 |
| G418(G 418,G-418,Geneticin) | Gibco | 11811031 | 5g | 1900 |
| G418(G 418,G-418,Geneticin) | Sigma | G5013 | 1g | 420 |
| G418(G 418,G-418,Geneticin) | Sigma | G5013 | 5g | 1800 |
简介 筛选 加药时间 挑选单克隆的优化 鉴定之后