|
英文名: DNase I，Deoxyribonuclease I
中文名称: 脱氧核糖核酸酶I
说明: 脱氧核糖核酸酶I是一种可以消化单链或双链DNA产生单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸的核酸内切酶。DNase I水解单链或双链DNA后的产物，5'端为磷酸基团，3'端为羟基。
DNase I活性依赖于钙离子，并能被镁离子或二价锰离子激活。镁离子存在条件下，DNase I可随机剪切双链DNA的任意位点；二价锰离子存在条件下，DNase I可在同一位点剪切DNA双链，形成平末端，或1-2个核苷酸突出的粘末端。
特点：不含RNase(RNase free)，可以用于各种RNA样品的处理。提供了用于DNase I失活所需的EDTA。
用途：制备不含DNA的RNA样品；RT-PCR反应前RNA样品中去除基因组DNA等可能的DNA污染；体外T7, T3, SP6等RNA Polymerases催化的RNA转录后去除DNA模板； DNase I footprinting研究DNA-蛋白质相互作用；缺口平移(nick translatioin)；产生DNA随机片断文库；细胞凋亡TUNEL检测中部分剪切基因组DNA作为阳性对照。
来源：从牛胰腺纯化得到。
分子量：约32kDa(单体)。
活性定义：37℃10分钟内，将能够完全降解1μg pBR322质粒DNA所需的酶量定义为1个活性单位。
活性检测条件：40mM Tris-HCl(pH8.0)，10mM MgSO4，1mM CaCl2，1μg of pBR322 DNA。
纯度：不含其它DNA内切酶和外切酶，不含RNA酶。
酶储存溶液：50mM Tris-acetate(pH7.5)，10mM CaCl2，50%(v/v)glycerol。
Reaction Buffer(10X)：100mM Tris-HCl(pH7.5 at 25℃)，25mM MgCl2，1mM CaCl2。
失活或抑制：加入EDTA至终浓度为2.5mM后，65℃加热10分钟可使DNase I失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金属离子螯合剂，达到毫摩尔/升浓度的锌离子，0.1%的SDS，14.aspx">DTT、巯基乙醇等还原剂，50-100mM以上盐浓度均对DNase I有显著抑制作用。
保存条件：-20℃保存。
注意事项： 如需对酶进行稀释，可以用酶储存液(50mM Tris-acetate(pH 7.5)，10mM CaCl2，50%(v/v)glycerol)进行稀释。
Simga相关产品资料
Sigma D5025 Deoxyribonuclease I from bovine pancreas
Type IV, lyophilized powder, Protein ≥80 %, ≥2,000 Kunitz units/mg protein
Synonym: Deoxyribonucleate 5′-oligonucleotido-hydrolase, DNase I
CAS Number: 9003-98-9
Description
Frequently Asked Questions Live Chat and Frequently Asked Questions are available for this Product.
Analysis Note Protein determined by biuret.
Application Used for the removal of DNA from protein samples.
Preparation Note Derived from New Zealand-sourced pancreas
Unit Definition One Kunitz unit will produce a ΔA260 of 0.001 per min per mL at pH 5.0 at 25 °C, using DNA, Type I or III as substrate. [Mg2+] = 4.2 mM.
Physical form Lyophilized powder containing 150.aspx">calcium chloride
Properties
type Type IV
form lyophilized powder
mol wt mol wt ~31 kDa
purified by 13600.aspx">chromatography
composition Protein, ≥80%
EQP level Premium
foreign activity Chymotrypsin ≤0.5%
Protease ≤0.05%
19079.aspx"> RNase ≤0.02%
storage temp. −20°C |