QuantiTect SYBR® Green RT-PCR Kit 使用SYBR Green I进行一步法定量RT-PCR，用于基因表达分析 一步法RT-PCR具有高特异性 可靠定量检测低丰度转录本 准确定量检测各种起始量样本 无需优化反应和循环条件 QuantiTect SYBR Green RT-PCR Kit使用SYBR Green I通过一步法real-time RT-PCR对RNA目标序列进行高特异性的定量检测。热启动和独特的实时定量PCR缓冲液确保了对RNA目标序列高特异性和灵敏度的real-time定量检测。dNTP混合液含有dUTP，可选择性进行UNG处理。QuantiTect SYBR Green RT-PCR Kit还含有优化的RT混合液，可对多种起始量的模板RNA进行高效、灵敏的逆转录。为便于使用，预混液可储存在2–8°C。 性能 QuantiTect SYBR Green RT-PCR Kit含有独特的逆转录酶，可高效、灵敏的进行cDNA合成在宽泛的范围内符合线性规律（参见Comparable results in one-step and two-step RT-PCR）。HotStarTaq DNA Polymerase提供严格的热启动，进一步提高了PCR反应的特异性（参见Highly specific amplification）。 原理 QuantiTect SYBR Green RT-PCR Kits含有优化的即用型预混液，可使用SYBR Green I对RNA靶序列进行高特异性和灵敏度的real-time定量分析。预混液中的荧光染料SYBR Green I可对很多不同的靶序列进行分析，无需合成靶标特异性标记引物。独特的PCR缓冲液含有K+和NH4+离子，能促使特异性引物退火，获得高RT-PCR特异性和灵敏度（参见Specific primer annealing）。此外，HotStarTaq DNA Polymerase具有严格的热启动，可防止非特异性产物的形成。 QuantiTect SYBR Green RT-PCR预混液含有dUTP，可在PCR前使用尿嘧啶DNA糖基化酶（UNG）预处理，保证之前反应残留的PCR产物不会影响后续的PCR反应。 2x QuantiTect SYBR Green RT-PCR Kit的组分 操作流程 QuantiTect SYBR Green RT-PCR Kit无需进行繁琐耗时的反应条件优化。只需简单地将引物和模板加入到即用型RT-PCR预混液中，即可开始反应（参见One-step RT-PCR）。使用操作手册中的实验方案可在任何real-time PCR仪上得到快速、可靠的结果。如果需要，反应液可用尿嘧啶DNA糖基化酶（UNG）预处理，以去除之前反应残留的PCR产物。 QuantiTect SYBR Green RT-PCR Kits配合QuantiTect Primer Assays可在基因表达分析中获得高度特异性的结果。基因组范围、生物信息学验证的引物对覆盖所有人类、小鼠、大鼠和其他各类生物基因。QuantiTect Primer Assays可在GeneGlobe网站上方便地订购。 应用 QuantiTect SYBR Green RT-PCR Kit可用在各种real-time PCR仪上对cDNA目标序列进行基因表达分析，包括Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche和Agilent的仪器。在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上使用时，我们推荐专门为快速PCR研发的Rotor-Gene SYBR Green RT-PCR Kit。