QIAGEN OneStep RT-PCR Kit专为进行便利、高灵敏度的一步式RT-PCR设计。其独特的酶和特别设计的缓冲液确保了逆转录和PCR反应高效、准确的进行，无需进行优化。 QIAGEN OneStep RT-PCR Enzyme Mix含有为逆转录和PCR反应特别设计的酶。Omniscript和Sensiscrip逆转录酶对RNA模板有高度亲和性，确保了RNA逆转录的灵敏度达到1 pg到2 µg。逆转录完成后，升温至95°C，保持15分钟，活化HotStarTaq DNA Polymerase，同时使逆转录酶失活。这种方法可减少引物二聚体等非特异性扩增产物的生成，并减小背景影响，确保RT-PCR的高度灵敏性和可重复性（参见"使用少量模板进行高特异性RT-PCR"和"高效检测病毒RNA"）。 退火温度范围大引物的最佳退火温度取决于碱基对的组成（如：A、T、G、C核苷酸的比例）、引物的浓度和反应的离子环境。QIAGEN PCR Buffers含有K+和NH4+。使用该缓冲液可在很大的温度范围内增加特异性PCR产物的产量（参见"QIAGEN PCR Buffers中的钾离子和铵离子促进特异性产物的生成"）。其原理是破坏非特异性结合的引物对，使反应更加活跃，减少繁琐的温度优化过程。相反，如使用仅含 K+的PCR或一步式RT-PCR缓冲液，PCR最佳退火温度的范围较小，可靠性较差；参见"一步式RT-PCR退火温度的影响"。 QIAGEN OneStep RT-PCR Buffer专为提高逆转录和PCR扩增的效率而设计。该缓冲液含有新型添加物，可防止逆转录酶对PCR扩增的抑制（这是一步式RT-PCR的常见问题）。该缓冲液确保了在较大温度范围和Mg2+浓度范围内，引物与模板特异性结合，可对所有RNA模板进行高效的 RT-PCR扩增。QIAGEN OneStep RT-PCR Kit含有Q-Solution，这是可修饰核酸的解链行为的新型添加物。Q-Solution可促进高GC含量或含较多二级结构的模板的逆转录和扩增（参见"使用Q-Solution对高GC含量的模板进行RT-PCR"）。使用Q-Solution可简化复杂模板RT-PCR的优化过程。QIAGEN OneStep RT-PCR Kit含有您所需的所有试剂，可进行快速、简便的高灵敏度RT-PCR。