现货|Ni-NTA Agarose (25 ml)

Ni-NTA Agarose
利用重力流层析纯化6xHis-tagged 蛋白
一步纯化就可以从细胞裂解液中得到纯度大于95% 的蛋白
高亲和力和高结合能力
可以选择在天然或变性条件下纯化蛋白
预先加载的即用型基质适合任何规模的蛋白纯化
提供自动纯化和检测的方法说明书
Ni-NTA Agarose 包含Ni-NTA及琼脂糖CL-6B基质在提供高结合能力的同时降低了非特异性结合(见图 "One-Step Purification under Native Conditions")。在以batch或column纯化方式的各种规模的蛋白纯化中都具有可操作性强等特点。Ni-NTA Agarose 可单独购买或者作为QIAexpress Kit 组分购买，QIAexpress Kit 是从E. coli中高效表达和纯化蛋白的完整试剂盒。
One-Step Purification under Native Conditions
原理   
QIAexpress Ni-NTA 蛋白纯化系统是建立在著名专利Ni-NTA树脂基础上，用于纯化带有6个组氨酸亲和标签的蛋白。此项技术可以在天然或变性条件下，从任何表达体系中一步纯化带有His标签的蛋白。NTA含有4个Ni2+的螯合位点，而金属-螯合体系只有3个Ni2+的螯合位点，因此NTA结合Ni2+更为牢固。较多的螯合位点有助于防止Ni2+脱落，因此蛋白的结合能力和纯度相比于金属-螯合体系来说都要高 （见图 "One-Step Purification under Native Conditions"）。QIAexpress 体系可以用于从各种表达系统（如杆状病毒，哺乳细胞，酵母以及细菌）中纯化His标签蛋白。
操作流程
纯化6xHis标签蛋白包括4个步骤：细胞裂解，蛋白结合，洗涤和洗脱（见流程图）。利用QIAexpress 体系纯化融合蛋白并不依赖于蛋白或6xHis标签的3维空间结构。这一特性使Ni-NTA可以从稀释溶液或裂解粗提液中，在天然或变性条件下一步纯化蛋白。另外，Ni-NTA与强变性剂兼容，而强变性剂可提高受体，膜蛋白或包涵体蛋白的溶解性，从而有效对这些蛋白进行纯化。可在洗涤液成分中加入高效去除非特异性结合的各种试剂（见表 "Reagents Compatible with the 6xHis/Ni-NTA Interaction"）。最后利用100-250 mM 的咪唑或降低pH值的方法在温和条件下洗脱得到纯化蛋白。
QIAexpress Ni-NTA蛋白纯化体系用于高效一步纯化6xHis-tagged蛋白，纯化后的蛋白适用于以下应用：
结构和功能研究
蛋白结晶，用于蛋白的三维结构检测
检测蛋白-蛋白，蛋白-DNA 相互作用研究（见QIAexpress Assay System）
抗体制备研究  
Ni-NTA 基质可以作为固定亲和配体用来结合6xHis-tagged 蛋白：
研究核酸和蛋白分析的相互作用
抗体纯化
分离无标签的互作亚基或核酸
配体和受体的相互作用研究
如需关于QIAexpress产品纯化 6xHis标签蛋白的文献列表，请访问QIAGEN 在线文献数据库