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Bac-to-Bac® Baculovirus Expression System
Bac-to-Bac® 杆状病毒表达系统 (Bac-to-Bac® Baculovirus Expression System) 能高效生成重组杆状病毒，用于在昆虫细胞中进行表达测试。 Bac-to-Bac® 系统依赖于通过 E. coli 中的位点特异性转座生成重组杆状病毒，而不是通过昆虫细胞内的同源重组（图 1）。 该系统的特点为：
■节约时间的表达杆状病毒质粒。 使用 Bac-to-Bac®，pFastBac™ 载体的表达盒在 DH10Bac™ E. coli 感受态细胞中与亲代杆状病毒质粒重组形成杆状病毒表达质粒。 然后，将该杆状病毒质粒转染进昆虫细胞，产生重组杆状病毒颗粒。
■简单的菌落筛选。 DH10Bac™ E. coli 中的亲代杆状病毒质粒含有 lacZα 基因的片段。 表达盒转座进杆状病毒质粒后，lacZα 基因被破坏，因此可以进行重组体蓝/白筛选。 因此，重组菌落的鉴别非常简单。
■重组蛋白的快速纯化。 pFastBac™ HT 载体生成带组氨酸标签的重组蛋白。 因此可以使用镍螯合树脂快速纯化蛋白质。
Bac-to-Bac® 杆状病毒表达系统设计用于重组杆状病毒的快速小规模生产。 pFastBac™ 1 载体提供用于蛋白质表达的多角体蛋白强启动子和用于简化克隆的大型多克隆位点。
Promoter: Polyhedrin
Vector Type: pFastBac
Product Size: 1 kit
Cloning Method: Restriction Enzyme ⁄ MCS
Protein Tag or Fusion: Untagged
Regulatory Statement: For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Each Bac-to-Bac® Baculovirus Expression System includes 10 µg of pFastBac™1 vector, 0.5 ml MAX Efficiency® DH10Bac™ Chemically Competent Cells, pFastBac™ 1-Gus control vector, and 1 ml of Cellfectin® Reagent.
Store MAX Efficiency® DH10Bac™ Competent Cells at -80°C. Store Cellfectin® Reagent and vectors at +4°C. All components are guaranteed stable for 6 months when properly stored. |