说明 微粒体囊泡被用于研究蛋白质的协同翻译和翻译后加工的初始过程。在微粒体膜存在的情况下,可通过合适的mRNA 在体外翻译来检验蛋白加工程序,这些程序包括信号肽剪切、膜插入、移位和核心糖基化。另外,也可以用Canine Pancreatic Microsomal Membranes ( 犬胰微粒体膜) 结合TNT® Lysate Systems(TNT® 裂解物系统) 对合适的DNA 模板进行转录/ 翻译反应,从而研究加工和糖基化过程。为了性能稳定、翻译反应中的抑制作用最小、本底最低,制备微粒体时去除了污染的膜片段以及内源性的、结合在膜上的核糖体和mRNA。使用两种不同的对照mRNA 模板,对膜制备物的信号肽酶和核心糖基化活性进行了检测。这两种对照mRNA 是E. coli的β- 内酰胺酶( 或氨苄青霉素抗性基因产物) 前体,以及啤酒酵母(S.cerevisiae ) 的α- 配合因子( 或α- 因子基因产物) 前体。 从含有编码大肠杆菌β- 内酰胺酶( 氨苄青霉素抗性基因产物)前体的基因序列的质粒上,使用SP6 RNA 聚合酶可转录得到对照信号序列mRNA( 大肠杆菌β- 内酰胺酶)。合成的RNA不含有帽类似物。该对照mRNA 用于检测信号肽酶活性,并与Canine Pancreatic Microsomal Membranes System 一起提供。 从含有啤酒酵母(S. cerevisiae )α- 配合因子(a-mating factor) 编码区的质粒上,使用SP6 RNA 聚合酶可转录得到Core Glycosylation Control mRNA (S. cerevisiae a-factor)( 对照核心糖基化mRNA( 啤酒酵母的α- 因子))。合成的RNA 不具有类似帽子结构,该对照mRNA 用于检测核心糖基化活性,并与Canine Pancreatic Microsomal Membranes System 一起提供。 特点 . 可靠:制备微粒体时去除了内源性的、结合在膜上的核糖体和mRNA,以确保微粒体膜的性能稳定,且对翻译反应的抑制作用最小、本底最低,并已使用兔网织红细胞裂解物系统检测过。