说明
ProFluor® Src-Family Kinase Assay(ProFluor® Src 家族蛋白激酶检测试剂盒) 可在多孔板模式下检测纯化的Src 家族激酶的活力( 已经经过检测的有Src, Lck, Lyn, Fyn 和Hck),只需" 加样-混合-检测" 的操作即可,尤其适合高通量应用。该试剂盒的第一步是一个标准的激酶反应,该反应使用的是系统中提供的、双酰胺罗丹明110标记的Src 家族激酶的底物肽。激酶反应之后,加入含有蛋白酶试剂的终止液,它可以既终止激酶反应,同时又能够特异性地从未被磷酸化的底物上去掉氨基酸,释放出游离的罗丹明110,后者产生强荧光。然而,磷酸化的底物可对抗蛋白酶试剂的消化作用,因此不产生荧光。所以,测定出的荧光强度与蛋白激酶的活力成反比。试剂盒中包含了一个对照肽(AAF-AMC),可在检测那些对磷酸酶可能产生抑制作用的受试化合物时使用。该试剂盒无论在96 孔板还是384 孔板检测时都有非常好的Z` 值(>0.7),并且易于从其它化合物中区分出已知的Src 家族激酶抑制剂。
特点 • 能够得到可预测的结果:无论在96 孔板还是384 孔板检测,Z`值都大于0.7。
• 受试化合物产生的干扰最小:罗丹明110 产生的荧光信号比其它受试物产生的荧光信号都强。
• 含有对照肽:使用对照肽(AAF-AMC) 可以监控蛋白酶活力,降低假阳性。
• 均质检测:简单的加样- 混合- 检测步骤减少了实验步骤。
• 无放射性:不产生放射性废物和安全隐患。
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