说明 TNT® Quick Coupled Transcription/Translation System(TNT®快速转录/ 翻译偶联系统) 可方便地在一个试管内进行偶联的转录/翻译反应，适合真核生物无细胞蛋白质表达。TNT® 快速转录/ 翻译偶联系统将RNA 聚合酶、核苷酸、盐类、氨基酸、重组的RNasin®核酸酶抑制剂与网织红细胞裂解物混合在一起，形成了TNT® 快速混合母液(Master Mix)。 TNT® 快速转录/ 翻译偶联系统有两种配置，分别对克隆在T7 或SP6 RNA 聚合酶启动子下游的基因进行转录和翻译。使用这两种系统时，模板DNA 的量为0.2-2.0mg，模板可以是带有T7 或SP6 启动子的环状质粒DNA，也可以是含有T7 启动子的PCR 片段，将模板加入到TNT® 快速混合母液，反应体系为50ml，30℃下孵育60-90分钟。表达反应可产生足够量的蛋白，用于包括GST pull-down 和凝胶阻滞电泳在内的多种实验。 无细胞体系表达出的蛋白的应用范围： • GST pull-downs • 凝胶阻滞电泳 • 免疫共沉淀 • 蛋白质修饰的特征研究 • 蛋白: RNA 相互作用 • 蛋白活性研究 • 基因产物的确认 • 蛋白截短实验(PTT) 特点 •更快获得数据：功能蛋白的表达只需一个小时，优于需要几天时间的细胞水平的表达系统。 •多种应用：表达的蛋白可应用于蛋白: 蛋白相互作用、蛋白: 核酸相互作用、蛋白修饰及其他研究领域。 •一致可靠的结果：不同于基于大肠杆菌的系统，基于哺乳动物的系统可表达经过翻译后修饰的可溶性的功能蛋白。 •步骤更少：表达的蛋白可直接使用，不需要再进行纯化。 •灵活的系统：TNT® 系统中使用的模板可以是线性或环状质粒DNA，也可以是PCR 产物。