说明
Tryptase ( 类胰蛋白酶) 是肥大细胞颗粒中的主要蛋白,它可以在精胺酸和赖氨酸残基处剪切肽链。类胰蛋白酶在肥大细胞颗粒中的储存和释放依赖于激活效应。重组人表皮βI 类胰蛋白酶(rhSkin β Tryptase) 与重组人肺βII 类胰蛋白酶(rhLung β Tryptase) 均是中性丝氨酸蛋白酶。人源β 类胰蛋白酶已被成功克隆,并在毕赤酵母(Pichia pastoris ) 中表达,为具有活性的四聚体酶,经亲和层析纯化。这两种酶有不同的缓冲液配方、酶浓度和糖基化特征。提供的rhLung Tryptase 溶于缓冲能力很低但浓度很高(2mg/ml) 的缓冲液中,不含肝素,用于色谱分析。将这两种重组酶连同天然的肺类胰蛋白酶进行糖苷酶消化,然后使用Western 分析,结果显示rhLung Tryptase 的糖基化特征与尸酶非常相似。
特异活性: 以 0.4mM Nα CBZ-L- 赖氨酸硫代苯酯作底物, 与 Ellman`s Reagent (5,5`-Dithio-bis(5-Nitrobenzoic Acid)) 共同应用时,在 1ml 的最终体积下,检测水解率,在 25 ℃ 条件下孵育 1 分钟 , 检测 410nm 处的吸光度值。 1 个酶单位定义为每分钟 1.0 个吸光度值的变化。
• rhSkin β 类胰蛋白酶 >1,000 u/mg 蛋白。
• rhLung β 类胰蛋白酶 >1,200u/mg 蛋白。浓度:
• rhSkin β 类胰蛋白酶: 200μg/ml ;
• rhLung β 类胰蛋白酶: 2mg/ml 。
特点 . 活性具有高特异性:比野生型的肺类胰蛋白酶高出130-150%。
• 结果一致:重组蛋白的表达可确保不同批次的酶均衡一致。
• 安全:避免接触与野生型尸体类胰蛋白酶相关的人类病原体。
• 纯度高:表皮类胰蛋白酶β 和肺类胰蛋白酶β 不含其它污染蛋白质,每毫克蛋白酶活力高,避免野生型胰蛋白酶与外源蛋白相互作用。
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