说明
GeneClip™ U1 Hairpin Cloning Systems(GeneClip™ U1 发夹克隆系统) 由线性质粒组成,这些质粒是为了在人类细胞中快速、简便地克隆人类目的序列,来表达短发夹RNAs(shRNAs) 而设计的。转染至人类细胞中后,从包含U1 RNA 聚合酶启动子和siRNA 模板的DNA 质粒可有效地进行短干扰RNAs(siRNAs) 的体内表达。U1启动子通常用于体外成功地产生发夹siRNAs。
为使发夹siRNA 插入pGeneClip™ 载体,将2 个短DNA 寡核苷酸退火,形成包含该发夹siRNA 的目的序列的DNA 插入物。退火后,寡核苷酸形成与pGeneClip™ Vector 末端匹配的突出末端,便于粘性末端连接。一经转染,RNA 聚合酶II 即在体内转录发夹插入序列,生成发夹siRNAs。
特点 • 更多载体选择:这些系统提供的载体含有各种用于稳定转染真核细胞的抗生素抗性选择标记物,或用于确定转染效率的hMGFP。
• 节省时间:载体以预消化的形式提供以减少载体制备的时间。
• 便利:每个系统都包含T4 DNA 连接酶, 2X 快速连接缓冲液, 寡核苷酸退火缓冲液和pGeneClip™ 载体。
• 轻松鉴定目的克隆:使用PstI 酶切快速鉴定阳性重组体。
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