1、 一步DNA修饰法与两步DNA修饰法有什么区别?
答:在一步法中DNA被热变性,即DNA变性与亚硫酸盐修饰同时进行,一步法DNA修饰适合于要求简单快速修饰DNA并且配备有热循环仪的实验室。在两步法DNA修饰中,DNA先经亚硫酸盐处理后才被化学变性,适用于各种来源材料提取的DNA修饰。一步法修饰可能会增加DNA的降解,所以起始材料的量理论上应该较两步法多。
2、 使用P-1001(Methylamp DNA modification kit)试剂盒修饰DNA需要多少起始DNA?
答:起始DNA样本可低至50 pg, 修饰的DNA信号在real-time PCR中能被检测到。
3、 在P-1001这款试剂盒中DNA的修饰为什么只需90 min?
答:用我们独特的修饰成份,90 min的时间已经足够完成超过99%的C-T转换,同时可阻止DNA降解。我们发现增加DNA的修饰时间C-T的转换没有明显增加,反而可能因为DNA的降解明显的降低了修饰DNA的产量。
4、 用P-1001这款试剂盒修饰过的DNA能保存多久?
答:在-20℃能保存2个月,在-80℃能保存6个月。
5、P-1001修饰的DNA可以是福尔马林固定和石蜡包埋的样品吗?
答:从石蜡包埋样品提取的DNA往往是片段,这款试剂盒适用于石蜡包埋的样品因为在修饰液中包含有DNA稳定剂,可以防止在修饰过程中DNA的进一步断裂。
6、我需要先从血液中提取DNA吗?
答:是的,DNA必须先从血液中提取出来然后才能用于修饰试剂盒。
7、试剂盒中的离心柱能结合多少DNA?
答:在每个修饰中DNA的最佳范围量是1 ng-1µg,柱子的最大结合量是5µg DNA。
8、在使用试剂盒时可以加携带DNA吗?
答:试验证明加入携带DNA只能使修饰DNA的产量略有增加。
9、在这些试剂盒中我能以细胞为起始材料吗?或者我必须先提取DNA做为起始材料吗?有没有产品可以提高微量DNA回收量?
答:是的,你可以用这款Whole Cell Bisulfite Modification Kit (Cat. No. P-1016) 以细胞为起始材料。P-1001和 P-1010这两款试剂盒是以提取的DNA为起始材料的。我们提供了DNA提取的增强剂来回收微量DNA,但就像上面提到的,它只是略微地增加DNA的回收量。
10、应该怎么保存试剂盒,-20℃还是4℃?
答:从发货算起试剂盒可以在室温下保存至少6个月, 2-8℃可以保存一年