应用程序
细胞凋亡检测光度酶免疫法用于定量测定体外细胞质histone-associated片段(单和oligonucleosomes)后诱导的细胞死亡。
该套件包含一个解决方案,允许用户终止反应的底物和运行试验条件下的定义,使之适用于高吞吐量的应用。
效益
•一步酶联免疫吸附试验
•高灵敏度:(5×102细胞/毫升)
•快速性能:(3-4小时)
•积极控制包括
•prelabeling细胞没有必要
•非放射性检测系统
•没有限制
•容易处理
•低背景
•抑制人体抗因子
•功能测试
产品说明
检测时间:
3 -4小时
负控制:
取决于细胞培养条件下,每个成倍增长的永久性细胞培养中含有一定量的死细胞(通常约3- 8%)。在免疫,这些固有的死细胞在未经处理的样品(无cell-death-inducing剂)将造成一定的吸光度值(阴性对照)。
积极控制:
一个复杂的DNA -组蛋白作为一个积极的控制。
材料样品:
细胞质组分(裂解)的细胞系,细胞体外,细胞培养上清,和血清或血浆
灵敏度:
精确的检测限死亡/死细胞在特定的样本强烈依赖于动力学的细胞死亡,细胞毒性剂使用,和数额的影响细胞的细胞的总人口。使用单/喜树碱(凸轮)作为细胞模型系统的细胞死亡,免疫允许特定的检测单和oligonucleosomes在细胞质部分125个细胞当量/好。
特异性:
抗组蛋白与蛋白之间,h2a,重组,h,各组不同物种(例如,人类,小鼠,大鼠,仓鼠,奶牛,负鼠,爪)。D NA结合单和双链脱氧核糖核酸。因此,该法可以检测单和oligonucleosomes从不同的物种,可用于测量细胞凋亡在许多不同的细胞系统。
背景信息
不同类型的真核细胞死亡可分的形态和生化标准:坏死和凋亡。坏死的同时,增加离子通透性的质膜;细胞膨胀和质膜破裂,几分钟内(渗透溶解)。细胞凋亡的特点是细胞膜起泡(zeiosis),细胞质凝聚,并激活一个内源性核酸内切酶。这钙离子和镁离子依赖性核酸切割双链脱氧核糖核酸在最方便的internucleosomal连接区域,生成单和oligonucleosomes。与此相反,脱氧核糖核酸核小体核心组蛋白紧密结合h2a,重组,h,各组,并从而防止切割的内切酶。脱氧核糖核酸片段的产生是一个离散的倍数180-bp亚基,检测作为一个“阶梯”琼脂糖凝胶提取和分离的支离破碎。丰富的单和oligonucleosomes在细胞质中的细胞凋亡是由于这一事实,降解发生前的几小时的血浆膜破裂。
内容
1.anti-histone-biotin(克隆h11-4)
2.anti-dna-pod(克隆mca-33)
3积极控制。
4孵化缓冲区。
5。裂解缓冲液
6基板缓冲区。
7.abts片
8.abts别解
9微孔板(链霉亲和)。
10胶盖箔。