赛默飞世尔公司旗下的Pierce推出了Western Blot的信号增强剂——SuperSignal Western Blot Enhancer。此增强剂包含两种试剂：抗原预处理液和一抗稀释液，能将信号强度和灵敏度提高3-10倍，从而显著降低背景，并增强低丰度和弱免疫反应性抗原的检测。
众所周知，Western blotting是鉴定蛋白的经典方法，但此过程中存在很多变数。抗原丰度、抗体的特异性和反应性等因素都会对结果产生相当大的影响。若是高丰度蛋白，那自然好办。若不幸研究的是低丰度蛋白，最后膜上出现了若有若无的一条带，那可真是纠结啊。说没有，似乎也有一条带；说有，似乎又像是背景。
为了解决你这种烦恼，赛默飞世尔公司旗下的Pierce推出了Western Blot的信号增强剂——SuperSignal Western Blot Enhancer。此增强剂包含两种试剂：抗原预处理液和一抗稀释液，能将信号强度和灵敏度提高3-10倍，从而显著降低背景，并增强低丰度和弱免疫反应性抗原的检测。
SuperSignal增强剂使用起来也很简单。在转印之后，封闭之前，用足量的抗原预处理液浸泡膜10分钟。一抗杂交前用一抗稀释液稀释一抗。其他操作均按照Western blotting的标准操作流程进行。此增强剂可用于PVDF膜或硝酸纤维素膜，并与荧光、比色法和化学发光检测兼容。
SuperSignal Western Blot增强剂的特点如下：
•提高灵敏度——实现信号强度和灵敏度的3-10倍提高
•改善特异性——改善质量差或低亲和力抗体的信噪比
•更清晰——降低背景，带来更干净的Western blot
•兼容性好——适合PVDF膜或硝酸纤维素膜，与荧光、比色法和化学发光检测兼容
细胞裂解液经过电泳分离后，转印到硝酸纤维素膜上，并利用常规方法（左）或SuperSignal Western Blot增强剂步骤（右）开展Western blotting。在上图中，带有PC-3裂解液的膜用含5%牛奶的TBST溶液封闭，并与小鼠抗CDK5（1µg/mL）和HRP结合的山羊抗小鼠IgG（0.1µg/mL）杂交。利用Pierce ECL底物检测（曝光1分钟）。在下图中，带有HeLa裂解液的膜用含有Thermo Scientific Blocker BLOTTO的TBS封闭，并与兔抗GSK3a（1µg/mL）和HRP结合的山羊抗兔IgG（0.1µg/mL）杂交。利用SuperSignal West Pico 化学发光底物检测（曝光10分钟）。
若你在Western blot中也常遇到低信号、高背景的情况，那不妨试试SuperSignal增强剂。